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小鼠LPS脂多糖 ELISA试剂盒

小鼠LPS脂多糖 ELISA试剂盒

简要描述:小鼠LPS脂多糖 ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠LPS脂多糖捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的 小鼠LPS脂多糖呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度

产品型号: 48T/96T

所属分类:试剂盒类

更新时间:2022-04-27

厂商性质:经销商

详情介绍

小鼠LPS脂多糖 ELISA试剂盒产品优势

1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、稳定性好、操作简便

2.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

提供售前、售中、售后技术支持,为您解决实验过程中遇到的问题。

标本要求

1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织弄碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

四、小鼠LPS脂多糖 ELISA试剂盒 试剂盒组成 

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12×8

12×8

标准品

0.3mL*6

0.3mL*6

样本稀释ye

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

五、操作流程

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

六、注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 封板膜只限一次性使用,避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。底物请避光保存

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。





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